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山羊血浆肝素钠抗凝注意事项

发布时间:2023/11/12 16:54:36   
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  正常山羊血清,来源于非免疫的山羊宿主,经过脂质萃取和含叠氮化钠的PBS溶液透析,改善其透明度。推荐用PBS将封闭血清原液稀释5-20倍,配成5%-20%的工作液,直接滴加在组织切片或者细胞涂片上,37℃度孵育10-30分钟,清除血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃过夜。注意:封闭用血清中不能含有目标蛋白,且与一抗来源不同,可用与二抗相同来源的封闭血清。

  

  待检样本会非异性的和蛋白结合,从而导致背景过高,因此可以用BSA或血清封闭掉这部分非异性的结合,从这点看,BSA和血清没有明显区别。

  

  待检样本中可能会有Fc受体,可以和抗体恒定区结合,与抗体异性无关,封闭血清中有抗体,因此用血清可以封闭掉一抗及二抗和样本Fc受体之间结合。BSA则无法封闭Fc受体。

  

  二抗来源的动物血清封闭的是组织上带电荷基团。因为组织中非抗原抗体反应出现的非异性背景染色,常见的原因是蛋白吸附于高电荷的胶元和结缔组织成分上。这并不影响接下来一抗的结合,因为这种结合是异的,亲和力远远高于因电荷作用的结合,因此会竞争胜出。

  

  山羊血浆(肝素钠抗凝)是通过无菌采集肝素钠抗凝山羊血,离心取上清制成。

  

  使用方法

  

  根据具体实验来使用。

  

  注意事项

  

  1、注意无菌操作,避免反复冻融。

  

  2、血浆冻融后可能出现的絮状沉淀物,通常是血浆冻融过程中脂蛋白的变性所造成,并不影响产品质量,可通过离心除去,离心条件为rpm,10min。



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