WB封闭液的主要作用有哪些？

1封闭非特异性结合位点，减少背景噪音，从而提高检测的特异性和灵敏度。封闭液中含有一些非特异性蛋白质或其他分子，可以与膜表面的非特异性结合位点结合，从而减少抗体与膜的非特异性结合，降低背景信号。

2封闭液还可以起到稳定膜的作用，防止膜在抗体孵育过程中干燥或损坏。

3封闭液还可以减少抗体在膜上的非特异性吸附，从而提高抗体的特异性和亲和力。

Westernblot封闭液配方有很多，为你推荐以下几种常用的配方：

5%脱脂奶粉：称取5g脱脂奶粉，溶于ml1xTBST。

3%BSA：称取3gBSA粉末，溶于ml1xTBST。

除了脱脂奶粉和BSA，还有一些其他常用的WB封闭液配方，比如：

5%明胶封闭液：称取5g明胶，溶于ml1xTBST。

5%酪蛋白封闭液：称取5g酪蛋白，溶于ml1xTBST。

封闭液的选取可参考以下建议：

避免使用牛奶或牛血清白蛋白：若使用来自山羊、马或绵羊的一抗，则需避免使用牛奶或牛血清白蛋白，因为牛的IgG可能会与抗体相互作用，产生干扰。

使用BSA时需注意：BSA和drymilk有时含有牛的IgG，许多其他的如抗牛、抗山羊和抗绵羊的二抗都会与牛的IgG发生反应。因此，使用BSA或drymilk进行阻断或稀释会显著增加背景并降低抗体效价。建议使用与二抗种属来源一致的标准血清进行阻断。