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预吸附(又称穿插吸附)是额外补充的纯化环节,旨在抬高抗体的奇异性。详细办法是,利器具备潜在穿插反响性的种属制备停止血清卵白,尔后让含二抗的溶液经过含有这类停止血清卵白的基质柱。非奇异性二抗会留在柱中,而高奇异性二抗将经过基质柱。
图1.在这个例子中,停止血清卵白利器具备潜在穿插反响性的种属(如羊IgG和牛IgG)制备,让也许辨别兔IgG轻链的二抗溶液经过含有这类停止血清卵白的基质柱。惟独对兔IgG轻链具备高度奇异性的抗体才气经过这个基质柱,与羊IgG和牛IgG有穿插反响的二抗会被吸附在柱中的血清卵白上。预吸附二抗的上风用于机关和细胞时,咱们不停倡议众人操纵预吸附(穿插吸附)二抗,以便最大限度地低沉非奇异性后台。除了在多种不同的测验中操纵,这些抗体在下列方面的影响尤其凸起:
多色测验
在举办多色组化或多色流式测验时,每每会需求操纵多个一抗搭配对应的二抗举办测验,在这类测验中,理当操纵在非一抗种属中制备的预吸附二抗,以低沉二抗产生穿插反响的危机,缩小染色后台的形成。
举例:操纵兔一抗和小鼠一抗举办双染测验时,请操纵针对小鼠血清举办责罚的?抗兔AlexaFluor?预吸附二抗和针对兔血清举办责罚的?抗小鼠AlexaFluor?预吸附二抗。
含洪量内源性免疫球卵白(Igs)的模范的IHC测验
应操纵在非模范种属中培育的预吸附二抗,以低沉二抗与内源性Igs产生穿插反响的危机。
举例:对人机关或?细胞系举办染色时,操纵针对人血清举办责罚的?鼠HRP预吸附二抗。
预吸附AlexaFluor?偶联二抗下表列示的悉数预吸附AlexaFluor?二抗均实用于ICC/IF、ELISA、IHC-P、IHC-Fr和流式细胞术。偶联抗体
产物名
AlexaFluor?
抗兔AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗大鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗山羊AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗鸡AlexaFluor?(IgYHL)预吸附二抗(ab)
AlexaFluor?
抗小鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗兔AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗大鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗山羊AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗鸡AlexaFluor?(IgYHL)预吸附二抗(ab)
AlexaFluor?
抗小鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗兔AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗大鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗山羊AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗鸡AlexaFluor?(IgYHL)预吸附二抗(ab)
AlexaFluor?
抗小鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗兔AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗大鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗山羊AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗鸡AlexaFluor?(IgYHL)预吸附二抗(ab)
AlexaFluor?
抗小鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗兔AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗大鼠AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗山羊AlexaFluor?(IgGHL)预吸附二抗(ab)
抗鸡AlexaFluor?(IgYHL)预吸附二抗(ab)
预吸附HRP偶联二抗需求仔细,部份预吸附HRP二抗仅实用于特定的运用,详细下列。产物名
运用
抗小鼠HRP(IgGHL)(ab)
IHC-P、ELISA、WB
抗兔HRP(IgGHL)(ab)
ICC、IHC-P、ELISA、WB
抗大鼠HRP(IgGHL)(ab)
ICC/IF、IHC-P、IHC-Fr、WB、ELISA、DotBlot
抗山羊HRP(IgGHL)(ab)
ICC、IHC-P、ELISA、WB
抗鸡HRP(IgYHL)(ab)
WB、免疫显微镜、ICC/IF、DotBlot、ELISA、IHC-P、IHC-Fr
预吸附生物素化二抗需求仔细,部份预吸附生物素化二抗仅实用于特定的运用,详细下列。产物名
运用
抗小鼠Biotin(IgGHL)预吸附二抗(ab)
ICC/IF、DotBlot、ELISA、IHC-P、IHC-Fr、免疫显微镜、WB
抗兔Biotin(IgGHL)预吸附二抗(ab)
ICC/IF、WB、ELISA、免疫显微镜、DotBlot、IHC-、IHC-Fr
抗大鼠Biotin(IgGHL)预吸附二抗(ab)
ICC/IF、WB、ELISA、免疫显微镜、DotBlot、IHC-P、IHC-Fr
抗山羊Biotin(IgGHL)预吸附二抗(ab)
ICC/IF、DotBlot、ELISA、IHC-P、IHC-Fr、免疫显微镜、WB
抗鸡Biotin(IgYHL)预吸附二抗(ab)
ICC/IF、DotBlot、ELISA、IHC-P、IHC-Fr、免疫显微镜、WB
AlexaFluor?是LifeTechnologies的挂号牌号。AlexaFluor?染料偶联抗体包括LifeTechnologies受权给Abcam的技能。
以上体例来自abcam中源生物是Abcam公司受权甲第代劳商
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