你是否遇到过以下几种难题，IHC实验结果不准确，背景高；多标记免疫组化实验中一抗种属来源相同时，不知该如何进行实验；IP/Co-IP后的WB实验出现非特异性条带；流式实验中没有合适的直标一抗......你是否知道通过选择正确的对照剂和封闭剂，可以帮助你解决这些实验中遇到的难题，且更容易获得准确的实验结果。本文将给大家带来流式细胞实验、WB、ELISA、IHC几大实验中常见的问题，及解决办法。

流式细胞实验（FlowCytometry）

WesternBlotting实验

ELISA实验

关于使用牛血清白蛋白(BSA)和牛奶作为封闭剂的Tips：BSA和drymilk有时含有牛的IgG。除了Jackson提供的牛来源抗山羊IgG的二抗外，许多其他的如抗牛、抗山羊和抗绵羊的二抗都会与牛的IgG发生反应。因此，使用BSA或drymilk进行阻断或稀释会显著增加背景并降低抗体效价。使用与二抗种属来源一致的标准血清(5%v/v)来进行阻断是更好的选择。

免疫组化实验

免疫试剂上文中提到的能够帮助解决实验里出现的问题的免疫试剂介绍如下：·标准血清（NormalSerums）标准血清来自未产生免疫反应的动物，因此不会检测到任何特异性抗原。在PBS(或类似的缓冲液)中稀释到5%(v/v)的标准血清被强烈推荐作为阻断剂，以减少非特异性、保守序列和/或fc受体结合的背景。最好的结果是使用稀释的来自同一宿主的正常血清作为标记抗体，在加入一抗之前作为单独的孵育步骤。相关产品推荐：

·从标准血清中提取的ChromPure纯化蛋白（ChromPurePurifiedProteinsfromNormalSerums）ChromPure蛋白主要用作一抗或二抗的实验对照。它们也可用作Westernblotting,IHC和IF的阻断试剂。ChromPure蛋白来源于未免疫动物的血清，不识别任何已知的抗原。它们是使用各种色谱技术制备的，以产生无污染分子观察到的浓度高达20mg/ml的材料，使它们成为最敏感的测定的实验对照的理想选择。ChromPure蛋白可用于许多物种的各种格式，包括全免疫球蛋白，F(ab’)2和Fab片段。

人IgM、血清IgA和其他蛋白质也可用。Jackson为该产品线提供了广泛的偶联物，包括一系列荧光染料和示踪酶，允许从非特异性相互作用中分辨出信号。

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·单价Fab片段亲和纯化抗体亲和纯化抗体fab片段可用于阻断内源性免疫球蛋白以减少背景染色和双标记来自同一宿主物种的主抗体。下面的例子展示了在小鼠组织上使用小鼠一抗时，如何使用Fab片段阻断内源性免疫球蛋白。

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·牛血清蛋白（无IgG，无蛋白酶）牛血清白蛋白(BSA)被广泛用作稀释抗体的载体蛋白，并在免疫测定和免疫检测方案中作为一种常用的蛋白质阻断剂。如果牛血清蛋白是您的试验所需的稀释剂或阻断剂，那么使用适合此目的的牛血清蛋白是很重要的。

牛IgG与山羊、绵羊和马的IgG有许多共同的表位，可以成为针对这些物种的二抗的靶点(牛抗山羊IgG除外)。这也可能发生在与牛IgG有交叉反应的其他抗体上。这些相互作用可能导致抗体活性的损失和/或背景增加。这些背景的产生可能来自于粘稠可溶性免疫复合物，或来自于因牛IgG蛋白的污染而产生的非特异性交叉反应。

关于JacksonImmunoresearchJacksonImmunoResearchInc.是美国著名的二抗生产商。30年的专注，30年的发展，JIR公司除了提供各种酶标（如鼠兔酶标二抗）及荧光二抗（AlexaFluor系列，Cy3/Cy5,PE等荧光标记），种类丰富，涉及物种齐全，标记多样，应用（WB/IF/IHC/FC）广泛，性价比高。

上海优宁维生物科技股份有限公司作为二抗金标准Jackson的全国代理商，携手Jackson为广大科研及工业客户带来品质优良价格实惠的各类二抗产品。