1.LowCross-Buffer具体是什么?

LowCrossBuffer是一种样品/抗体缓冲液，用于免疫分析（如ELISA、Westernblotting、蛋白质阵列和免疫PCR）。它有助于消除干扰。干扰如非特异性结合、交叉反应和基质效应。抗体和抗原之间的高亲和力结合不会受到负面影响，而抗体的不必要结合会受到抑制。

2.LowCross-Buffer为什么能减少基质效应?

大多数所谓的基质效应都是基于基质成分（如人血清样本中的血清蛋白）与待测物或抗体之间不需要的低或中亲和力结合。

待测物可能会被样本中的蛋白质或其他成分所掩盖，从而导致抗体不能与待测物结合。此外，基质成分也可能会掩盖抗体。LowCrossBuffer减少了抗体的掩蔽。

3.LowCross-Buffer该怎样使用?

LowCrossBuffer是用于标本（如血清或血浆）和/或检测抗体的稀释缓冲液。这取决于实验干扰。如果干扰如非特异性结合或交叉反应来自检测抗体，我们建议在LowCrossBuffer中稀释检测抗体。

4.LowCross-Buffer需要稀释使用吗?

不用。LowCross-Buffer为即用型，

样本或检测抗体可直接用这个缓冲液稀释。只有在竞争性分析或者某些应用如免疫组织化学中，可以用水货PBS稀释LowCross-Buffer后使用。在这种情况下，用户需通过测试找到理想的混合比。

5.LowCross-Buffer可以与单克隆或多克隆抗体一起使用吗?

可以。但如果你使用多克隆抗体，需注意多克隆抗体组成中含有许多不同亲和力的抗体，LowCross-Buffer仅允许高亲和力结合，而低亲和力和重亲和力结合则会减少。如果使用LowCross-Buffer，可能需要适度增加多克隆检测抗体的浓度。抗体浓度的增加也会增加高亲和力抗体的浓度。而LowCross-Buffer可以抑制低亲和力和中亲和力抗体的结合。

是否必须增加抗体的浓度取决于抗体的质量。

6.LowCross-Buffer缓冲液的组分是否会影响酶法检测的显色反应?

LowCross-Buffer不会对碱性磷酸酶或过氧化物酶的酶活性产生负面影响。有时用户使用LowCross-Buffer孵育标记的抗体可以增加酶活性。

7.采用过氧化物酶标记二抗进行检测的夹心法ELISA，实验结果出现背景的情况，这是什么原因导致的呢？使用LowCross-Buffer是否会有帮助?

重要的是要知道二抗是否经其他哺乳动物的抗体预吸附处理。抗兔IgG的二抗也可与小鼠IgG或山羊IgG发生高亲和力的交叉反应，除非针对这些物种的抗体进行纯化。原因是哺乳动物抗体序列同源性高。二抗通常不纯化（预吸附），因此会发生高亲和力的交叉反应。在这种情况下，使用LowCrossBuffer没有帮助。二抗必须更换成不与包被抗体发生交叉反应的预吸附的抗体。

8.LowCrossBuffer是否可以与荧光染料结合使用，譬如在蛋白分析中？

可以。蛋白分析中会带来积极的实验结果。

在某些使用青色染料（例如Cy5、Cy3、Oyster-dyes)应用中，结合LowCrossBuffer使用可以观察到荧光信号增强。

9.LowCross-Buffer能否多次冻融?

LowCross-Buffer可经数次冻融，但重要的是在使用前需将该缓冲液充分混合。

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